尿液细胞外囊泡 (uEV) 成为各种肾脏疾病的非侵入性生物标志物，但尚不清楚肾单位质量的差异如何影响uEV 分泌。为了解决这个问题，来自荷兰鹿特丹大学医学中心的研究人员在人肾切除术和大鼠肾切除术之前和之后测量了 uEV 分泌，发现肾功能、肾体积和肾重量与uEV分泌有关，但由于肥大、肾切除术导致的uEV分泌减少低于预期。该研究发表于J Extracell Vesicles杂志上。尿液来源的细胞外囊泡 (uEV) 是由肾脏和泌尿道细胞分泌的纳米级膜囊泡。uEV来源于多泡体与细胞膜的融合（外泌体），或者来源于细胞膜的直接向外出芽（微泡和凋亡小体）。由于 uEV 蛋白质组和转录组包含许多与疾病相关的蛋白质和转录物，因此研究人员正在探索uEV 用于肾功能、肾脏疾病和泌尿系统疾病的非侵入性生物标志物。 uEV 生物标志物已在急性肾损伤、多囊肾病、肾小球疾病和肾小管病患者中被发现。此外，还对 uEV 进行了分析，以确定肾移植功能和排斥反应的生物标志物。尽管在 uEV 中可检测到许多蛋白质，但在临床应用之前仍必须解决一些关于uEV 研究的方法学问题。 由于临床通量大、EV 货物降解的风险较低，分析尿液中的uEV 生物标志物是最理想的选择。因此，研究人员比较了几种直接在微量尿液中标准化、量化和表征 uEV 的方法（即无需 uEV 分离）。在之前的这项研究中，uEV 使用纳米粒子追踪分析 (NTA)、基于 CD9 的时间分辨荧光免疫测定 (CD9-TR-FIA) 和最近开发的称为 EVQuant 的方法进行量化和表征。使用这些方法，研究人员确定了在包括肾脏疾病在内的各种环境中，尿肌酐和 uEV 浓度之间的个体内和个体间呈正相关。因此，研究人员提出尿肌酐可用于使尿液中的 uEV 蛋白标准化。然而，一个仍未解决的问题是 uEV 分泌是否取决于肾单位质量以及肾单位损失对 uEV 分泌的影响。由于大部分 uEV 由肾上皮细胞分泌，因此预测肾单位损失将均匀地减少 uEV 分泌。因此，在目前的研究中，研究人员假设肾功能、肾体积或肾重量（作为肾单位质量的代表）决定uEV 分泌，而肾切除术会减少 uEV 分泌。为了解决这个问题，研究人员分析了 24 小时内的 uEV 分泌，并在肾切除术前后患者以及肾切除术前后的大鼠中分析了供体的尿液。在男性和女性供体中，使用纳米粒子追踪分析、EVQuant 和 CD9 时间分辨荧光免疫测定法对无细胞现场尿样和24小时尿样中的uEV进行量化。结果显示，女性供体的肾脏总体积 (TKV)显著降低，排出的 uEV 比男性供体少49%。uEV分泌与估计的肾小球滤过率(eGFR)、肌酐清除率和TKV 呈正相关（R= 0.6-0.7）。将uEV/肌酐乘以24小时尿肌酐后，也可以从现场尿液中预测uEV分泌率。供体肾切除导致eGFR降低了36%±10%，但uEVs的分泌量仅降低了16%（CD9+ uEVs=37%，CD9-uEVs没有减少）。在校正肾切除影响后，供体肾切除使 uEV 中的足细胞标志物 WT-1 和近端小管标志物 NHE3、NaPi-IIa和cubilin 增加了2到4倍。在大鼠中，GFR和肾脏重量的变化与uEV 分泌率的变化相关（R = 0.46-0.60，P< 0.01）。此外，估计的肥大程度与uEV分泌率的变化相匹配（单肾切除术后1.4 至 1.5 倍，5/6肾切除术后是4倍）。总之，这些数据显示uEV分泌取决于肾单位质量，并且基于代偿性肥大导致的肾单位损失，而肾切除术减少 uEV 分泌低于预期。研究结果认为，在比较个体之间的 uEV 生物标志物时，应包括对肾单位质量或 uEV 分泌率的测量。参考文献：Nephron mass determines the excretionrate of urinary extracellular vesicles. J Extracell Vesicles. 2022Jan;11(1):e12181.外泌体资讯网 JEV：肾单位质量决定了尿液来源细胞外囊泡的分泌量
