小编hzangs在本周的最新文献中选取了4篇分享给大家。这周的内容主要涉及了胞外囊泡的快速简易提取方法、胞外囊泡对免疫细胞的影响、胞外囊泡与肠道粘膜免疫、胞外囊泡与EMT过程。分享给大家，希望使大家略有收获。大家可以重点阅读一下第一篇文章，稳重分享的方法可以替代很多沉淀试剂盒，该文章的原文我已经放在论坛里最新进展板块，感兴趣的可以下载精读。
1. ExtraPEG: A PolyethyleneGlycol-Based Method for Enrichment of Extracellular Vesicles。ExtraPEG：一种以聚乙二醇为基础的胞外囊泡富集方法。 [Sci Rep] IF=5.578。PMID:27068479
摘要：细胞分泌的胞外囊泡，例如外泌体，最初被认为是细胞用来排除胞内废物的方式，现在被公认在多种健康或者疾病过程中发挥作用。虽然外泌体在体液中大量存在，但是由于其理化特性，纯化外泌体还是面临着诸多困难。近段时间来，容易操作的商业化试剂盒被很多人用于分离外泌体，但由于其低纯度和高污染量一直制约着它们的推广和应用。本文中，我们介绍了一种纯化外泌体和其他胞外囊泡的方法，该方法由过去利用聚乙二醇富集病毒的方法发展而来。这个技术被我们称为—ExtraPEG，该方法可以从大体积的培养液中通过低速离心配合小体积的超速离心纯化从而快速和廉价的富集外泌体。该方法富集的外泌体可以用于后续的外泌体定量以及蛋白和RNA的定量分析，蛋白组学和测序分析，这也证明该方法可以用于生物标志物的开发和未来诊断应用中。同时，进一步的实验证明该方法分离得到的囊泡的生物活性并未受到影响。ExtraPEG方法通过简易改变即可适用于不同囊泡组分的富集，也可以也用来作为进一步纯化前的高效浓缩过程。这一方法可适用于多种多样的体液中囊泡的分离，分离得到的囊泡可用于各种各样的后续研究。
PS：还在为SBI、Life的沉淀试剂盒贵的气人而郁闷么？那就好好读一读这篇paper吧。其实SBI和Life等多家公司的沉淀试剂盒就是使用了该文章所提到的PEG聚沉的方法。动辄过万的试剂盒其主要的原理便是其中溶解的PEG，而PEG的价格大家都可以承受。一直喜欢使用沉淀法分离外泌体的朋友们，来读读这篇文章吧，可以节省不少经费呢。
论坛文章链接：http://www.exosome.com.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=671&page=1&extra=&_dsign=7d6367df
2. Differential and transferable modulatoryeffects of mesenchymal stromal cell-derived extracellular vesicles on T, B andNK cell functions。间充质细胞来源的胞外囊泡对T,B和NK细胞功能的不同影响。 [Sci Rep] IF=5.578。 PMID:27071676
摘要：间充质干细胞（MSCs）是一种多能性细胞，由于它们可以分泌大量的细胞因子来改变相关组织的微环境而被用于再生医学和多种炎症性疾病。最近，一些报道显示MSC分泌的胞外囊泡（EVs）对多种疾病模型动物具有治疗作用。本文中，我们使用一个标准化实验方法来分析MSCs来源的Evs对外周血单核细胞、T、B和NK 细胞的免疫调节作用。我们发现了EV介导的免疫抑制程度和免疫细胞摄取EV量之间的直接关系，同时我们发现了静息态的MSCs可以通过EV来影响T细胞的增殖但并不是通过抑制T细胞分裂实现的。由此我们认为，通过这种可重复的实验不仅可用于研究MSC来源的Evs的性质，同时可以用来评估EV作为一种非细胞疗法对多种炎症性疾病的潜在治疗意义。
PS：文章研究了间充质干细胞来源的EV对不同免疫细胞的功能影响，通过提出了一种相对标准化和可重复的实验方法体系，有兴趣的朋友可以了解一下。
3. Exosomes in Human Breast Milk PromoteEMT. 人乳汁来源的外泌体会促进EMT。[Clin Cancer Res] IF= 8.722。PMID：27060153
摘要：妊娠增加了女性在产后五年罹患乳腺癌的风险。在断奶和复旧过程中，乳腺微环境是具有促进肿瘤发生的状态。外泌体在各种生理过程中均发挥着促进细胞间通信的作用，不进在分泌乳汁方面，同样在乳腺癌过程中也发挥着类似作用。我们研究了正常哺乳期女性乳汁来源的外泌体对乳腺癌发生发展的影响。TGFβ2在断奶和复旧过程中乳房分泌的乳汁来源外泌体中含量显著上升。乳汁外泌体中的高水平的TGFβ2会诱导良性和恶性乳腺上皮细胞发生改变，这些变化与乳腺癌的发生发展一致，这暗示着乳汁中高水平的TGFβ2可能是诱发乳腺癌的高危因素。
PS：一篇另辟蹊径的文章，作者研究了乳汁中外泌体对乳腺癌的作用，数据显示乳汁外泌体中的TGFβ2可能对乳腺癌的发生来说是一个危险因素，这可能从一定程度上支持了女性哺乳断奶和复旧过程对乳腺癌具有促进作用的观点，并且一定程度上给出了一些解释，相关领域的可以读一读。
4. Exosome in Intestinal Mucosal Immunity.外泌体与肠粘膜免疫. [J Gastroenterol Hepatol]IF=3.504 PMID：27061439
摘要：免疫细胞间的通信是引发炎症反应的关键。在肠粘膜处，促炎和抗炎炎症因子的不均衡，尤其是细胞因子和趋化因子，决定了肠炎症性疾病（IBD）的免疫机制。外泌体，细胞分泌到保外环境中的一种小的膜泡结构，显现出其在免疫过程中介导胞外信号传递的重要地位。近期该领域的最大进展在于揭示了外泌体可以利用自身携带的mRNAs和miRNAs来介导免疫细胞间信号传递和功能调节。RAB27A和RAB27B是涉及到外泌体分泌的两个GTPase。肠道粘膜免疫中，相比健康人，溃疡性结肠炎病人肠道粘膜的RAB27A和RAB27B阳性的免疫细胞数量明显增加。这暗示这外泌体介导的免疫反应可能在IBD的形成中具有重要作用。本文中，我们讨论了外泌体在免疫方面的性质和近期外泌体在肠道粘膜免疫中的研究进展。
PS：一篇小的综述性文章，主要介绍了外泌体在肠道粘膜免疫方面的研究进展，感兴趣的可以适当参考。
今天的整理就到这里。利用PEG来聚沉大体系中的胞外囊泡，再通过小体系的超速离心纯化胞外囊泡是一个不错的策略。SBI、Life甚至一些国产的外泌体沉淀试剂盒动辄都是几十毫升几千上万的价格，而其主要成分就是PEG，如果可以通过该文章建立自己实验室的沉淀分离方法，也可以给实验室节省高额经费。希望大家可以在这篇文章中收益。今天的分享就到这里，大家下周见！
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