外泌体PD-L1已被证明是癌症诊断和免疫治疗疗效预测的有效标志物；然而在癌症诊断中依据外泌体PD-L1水平判断，仍存在一定比例的假阳性和假阴性结果。研究表明，外泌体PD-L1蛋白存在较高的糖基化异质性；此外糖基化修饰在PD-L1/PD-1相互作用中起重要作用，可促进抑制CD8+ T细胞增殖。与总外泌体PD-L1相比，糖基化外泌体PD-L1很可能是一种更可靠的癌症诊断和免疫治疗疗效预测的标志物。因此，准确定量糖基化外泌体PD-L1对于探索外泌体PD-L1在癌症诊断中的意义以及开发更有效的预测免疫治疗疗效的标志物具有重要意义。然而，糖蛋白检测主要依赖凝集素分析和质谱分析，通常需要从外泌体中纯化特定糖蛋白，难适用于大量临床样品；而代谢聚糖标记需要采用生物代谢，局限于活细胞分泌的外泌体检测，也难以应用于临床样品。因此，迫切需要开发一种可用于临床样品的糖基化外泌体PD-L1精准定量方法。

近日， 厦门大学宋彦龄教授团队开发了一种基于适体和凝集素双识别诱导的邻近连接反应，并结合荧光定量PCR的方法，用于精准定量糖基化外泌体PD-L1。研究成果以“Quantification-Promoted Discovery of Glycosylated Exosomal PD-L1 as a Potential Tumor Biomarker”为题发表在国际期刊Small Methods上(2022 Jul 10;e2200549)。

该方法利用非代谢的凝集素（ConA）标记聚糖，利用亲和力不受糖基化修饰影响的适体标记PD-L1蛋白，通过双识别触发的邻位连接实现了免清洗、高灵敏、高选择性糖基化外泌体PD-L1精准定量。该方法对糖基化外泌体PD-L1的检测限为1.09 pg/mL；通过糖基化外泌体PD-L1水平可显著区分健康供体和癌症患者，灵敏度和特异性为100%。糖基化外泌体PD-L1首次被确定为一种可靠的肿瘤诊断生物标志物。该方法在揭示外泌体PD-L1糖基化的生物学意义以及将糖基化外泌体PD-L1转化为可靠的临床指标方面具有较大潜力。

​糖基化外泌体PD-L1定量检测示意图

参考文献：

Quantification-Promoted Discovery of Glycosylated Exosomal PD-L1 as a Potential Tumor Biomarker. Small Methods. 2022 Jul 10;e2200549. doi: 10.1002/smtd.202200549.

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