本周hzangs君在最新文献中选取了8篇分享给大家，其中4篇提供了中文摘要，另外4篇属于我们经常接触到的内容，大家可以了解一下。这周的内容主要涉及到外泌体流式分析、免疫排斥、囊泡载体、外泌体分离方法比较、外泌体及其内容物在心脏修复和皮肤再生过程中的作用等。相关文章的原文都在论坛同名贴下，需要的可以到论坛下载。
1. Identification and characterization ofEGF receptor in individual exosomes by fluorescence-activated vesicle sorting.通过基于荧光的囊泡分选系统鉴定和定性单个外泌体携带的EGF受体。 [J Extracell Vesicles] IF=？ PMID：27345057
摘要：外泌体是细胞分泌的40-130nm直径的细胞外囊泡。近期的研究发现它们在细胞间通讯过程中发挥着重要作用，同时它们在疾病标志物和药物递送方面都有很大的潜力。目前还不清楚一个细胞分泌的不同亚群的外泌体所包含的物质是否一样。要回答这一问题，就需要高分辨率的分析方法。我们利用商业化的流式细胞仪和荧光直标抗体进行试验分析，展示了如何使用荧光囊泡分选方法（FAVS）对来自人结直肠癌细胞系来源的通过差速离心分离的囊泡进行分选。通过FAVS方法我们检测到了单个外泌体上EGFR和外泌体标记物CD9；而且，通过随机光学重构显微镜观察到了分选的EGFR/CD9双阳性外泌体表面两个蛋白的阳性信号。我们数据显示了使用识别EGFR激活状态的单克隆抗体分析结直肠癌细胞来源外泌体EGFR状态的可行性。利用人特异性抗体，我们还能够从结直肠癌荷瘤裸鼠血浆中检测人源EGFR和CD9阳性的外泌体。利用多荧光通道FAVS可以同时识别携带有CD9、EGFR和EGFR配体AREG的外泌体。这些研究表明了FAVS基于特异性表面标志物分析和分选单个外泌体的可行性。我们认为FAVS是监测人体循环外泌体中EGFR和AREG以及其他肿瘤特定标志物的有力工具。
PS：JEV发表的利用流式细胞仪分析单个外泌体表面蛋白的技术性文章。随着对细胞外囊泡的逐步深入了解，分析单个外泌体了解外泌体的亚群特性越来越受到重视，有意了解这块内容的朋友可以阅读一下。
2. Donor dendritic cell-derived exosomespromote allograft-targeting immune response.供体组织中树突细胞来源的外泌体会促进靶向供体组织的免疫反应。[J Clin Invest] IF=12.575。 PMID: 27348586
摘要：对异体器官的免疫排斥反应是免疫系统最剧烈的反应之一。急性免疫排斥是由供体组织树突状细胞（DC）迁移到受体淋巴组织激活受体免疫系统中同种异体反应性T细胞直接识别供体MHC分子攻击供体组织细胞。本文中，我们使用小鼠心脏移植模型发现只有小部分的供体DC细胞会进入受体淋巴组织，研究了有限的供体DC细胞如何高效激活受体同种异体反应性T细胞并引起急性排斥。在我们的小鼠模型中，供体MHC分子通过细胞外囊泡传递给受体DC细胞，这些细胞外囊泡的性状与外泌体相近。受体DC细胞吸收或识别这些囊泡后会激活同种异体反应性T细胞。在小鼠心脏移植后清除受体的DC细胞可以显著降低供体MHC分子向同种异体反应性T细胞的呈递从而延缓移植反应。
PS：之前的周总结也介绍过囊泡在移植排斥中的作用，该文章指出了移植急性排斥中供体组织DC细胞的囊泡传递给受体DC细胞而激活急性排斥，是我们对急性排斥的机制有了更深入的了解。
3. RNAi delivery by exosome-mimeticnanovesicles - Implications for targeting c-Myc in cancer.通过类外泌体纳米囊泡呈递RNAi分子靶向癌细胞中c-Myc分子。[Biomaterials] IF=8.387. PMID: 27344366
摘要：发展RNA为基础的治疗方法就必须制造递呈RNA分子到细胞质的递呈系统。细胞释放的外泌体被认为是优良的RNAi递呈系统，但是细胞培养系统产生外泌体的效率十分低下。我们通过使用纳米级滤器挤压细胞产生类外泌体样纳米囊泡（NV），得到了百倍于培养系统的细胞外囊泡产率。我们测试了：1、NV是否可以装载內源或外源siRNA，2、转载有siRNA的NV是否可以被受体细胞摄取，3、这些siRNA是否可以下调受体细胞内特定mRNA水平。通过电穿孔将靶向GFP的siRNA装在到NV中，或在细胞中表达c-Myc shRNA。进一步实验证实两种装载方法都可以高效装在siRNA，这些NV会被受体细胞摄取并抑制靶基因的表达。我们的研究表明，类外泌体纳米囊泡可以作为递呈RNAi分子到靶细胞质的递呈平台。
PS：利用细胞外囊泡作为药物呈递系统一直是囊泡领域的研究热点，该文章介绍了利用特定方法高效产生类外泌体样纳米囊泡并用于RNAi分子递呈的研究结果，该结果显示出了这一系统的有效性。
4. Urinary extracellular vesicles for RNAextraction: optimization of a protocol devoid of prokaryote contamination.从尿液胞外囊泡中提取RNA：优化去除原核生物污染及RNA抽提方法。[J Extracell Vesicles] IF=？. PMID: 27345058
摘要：尿液中细胞外囊泡（UEVs）是理想的生物标志物开发平台。他们携带有不同种类的RNA，它们是否含有18s和28srRNA还存在争议。而且，高质量尿液RNA抽提方法还不是很完善。我们通过静压滤过透析方法富集尿液中的细胞外囊泡（UEVs），使用7种商业化的RNA抽提方法抽提RNA。通过分光光度法和荧光法定量RNA同时通过毛细管电泳检测RNA的质量。以细胞RNA为对照，原核RNA被掺入UEVs样品。去除尿液中细菌我们尝试了离心、过滤（0.22微米滤器）、化学预处理，并利用涂细菌平板的方法平板去除细菌的效果。对于大于200ml的尿液样本，化学处理对囊泡的完整性及蛋白RNA组成并无明显影响。我们使用7种方法富集尿液中RNA并对RNA的质量和数量进行评判。a、荧光计检测RNA产量相比分光光度计检测有更好的可重复性；b、UEVs中富含小RNA；c、在所有的RNA样品中并未检测到核糖体RNA的特异性峰；d、基于柱纯化的方法富集RNA的产率更高而TRIzol法抽提得到的microRNA更多。同时我们的经验表明，至少250毫升的尿液才能收集到足够的RNA用于收集定量、检测质量和下游分析。
PS：尿液外泌体的分离及RNA抽提是很多朋友问到过的问题，本周JEV刊发了一篇专门介绍尿液外泌体分离及RNA抽提方法的文章，相关领域的朋友可以读一读。
5. Exosomes miR-126a released from MDSCinduced by DOX treatment promotes lung metastasis.DOX处理的MDSC释放的外泌体中携带的miR-126a可以促进肺转移。[Oncogene] IF=7.932 PMID：27345402
6. The roles and implications of exosomesin sarcoma.外泌体在肉瘤中的作用。[Cancer Metastasis Rev] IF=5.316. PMID:27342745
7. Cardiac progenitor cell-derivedexosomes prevent cardiomyocytes apoptosis through exosomal miR-21 by targetingPDCD4.心肌前体细胞来源的外泌体携带有miR-21可以靶向PDCD4从而阻止心肌细胞凋亡。[Cell Death Dis] IF=5.378. PMID:27336721
8. HucMSC Exosome-Delivered 14-3-3zetaOrchestrates Self-control of the Wnt Response via Modulation of YAP duringCutaneous Regeneration.人间充质干细胞来源的外泌体中14-3-3zeta通过调节YAP来控制Wnt信号通路在皮肤再生过程中的水平。[Stem Cells] IF=5.902. PMID: 27334574
今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！
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