国内外泌体领域进展总结（2023年8月）

8月份国内新出的细胞外囊泡/外泌体领域论文不完全统计有348篇。IF>10的有74篇、IF>20的有5篇。本期主要内容包括：用于外泌体分析的光学生物芯片、促进原位细胞外囊泡产生增强周围神经修复、水果源细胞外囊泡、骨再生、神经保护与神经再生、骨关节炎治疗、CAR-T细胞衍生的外泌体、工程细胞外囊泡递送的CRISPR/Cas9、乳腺癌细胞外泌体miR-204-5p、蚊子共生体的外膜囊泡、微血管生态位重塑诱导肝细胞癌转移、γδ-T细胞的EV、hiPSC心肌细胞衍生的外泌体、抗原呈递等方面内容。内容十分丰富，不容错过。全部文献列表及部分文章原文可在外泌体之家论坛同名贴下下载。

1.中国科学院大学宋延林研究员等：用于即时多重可视化外泌体分析的印刷分区光学生物芯片

Yang, X., et al. (2023). "Printed Divisional Optical Biochip for Multiplex Visualizable Exosome Analysis at Point-Of-Care."

Adv Mater: e2304935. IF=29.4

癌症的早期诊断和术后监测中，各种外泌体的快速检测具有重要意义。该研究报告了一种分区光学生物芯片，通过纳米链的自组装和精确表面图案相结合进行多重外泌体分析。由于共振诱导的近场增强，纳米链在捕获目标外泌体后显示出明显的颜色变化，以进行直接视觉检测。然后，通过设计的亲水性和疏水性图案制备了一系列结合了几种特定抗体的分区纳米链生物芯片。由于显著的润湿性差异，一个样品液滴被精确地自动分裂成几个微小液滴，使得在30分钟内同时识别多个目标外泌体，并且灵敏度为6×10（7）颗/毫升，比酶联免疫吸附法低两个数量级。除了微量检测外，还展示了优秀的半定量能力，可以区分胶质母细胞瘤患者和健康人群的临床外泌体。这种方法简单、多功能、高效，可以作为许多疾病的诊断工具推广，促进液体活检的发展。

2.空军军医大学：新型超顺磁性多功能神经支架——远程驱动策略促进原位细胞外囊泡产生，增强周围神经修复

Xia, B., et al. (2023). "A Novel Superparamagnetic Multifunctional Nerve Scaffold: Remote Actuation Strategy to Boost in situ Extracellular Vesicles Production for Enhanced Peripheral Nerve Repair."

Adv Mater: e2305374. IF=29.4

细胞外囊泡（EVs）具有丰富的生物活性信号物质，因此在再生医学中，与基于细胞的治疗相比，具有固有优势。已经提出了几种策略来调节体外EVs的产生。然而，在体内操纵EVs的产生仍然是一个挑战，这对于旨在促进组织再生的EVs治疗尤其是长期治疗周围神经病变等疾病的治疗方案而言，存在重大困难。因此，本文构建了一种超顺磁纳米复合支架，通过将聚乙二醇/聚乙烯亚胺修饰的超顺磁性纳米颗粒纳入聚丙烯酰胺/透明质酸双网络水凝胶（Mag-gel）中，实现了对EVs产生的精确控制。Mag-gel对旋转磁场（RMF）高度敏感，并可作为机械刺激平台，对包埋的Schwann细胞（SCs）施加微/纳尺度力以支持神经再生。通过切换RMF的ON/OFF状态，Mag-gel可以在体外和体内扩大SCs衍生EVs（SCs-EVs）的局部产量。进一步的转录组测序表明，在带有RMF的Mag-gel中，SCs-EVs中有利于轴突生长、血管生成和炎性调节的转录本富集，最终导致体内神经修复得到优化。总体而言，该研究提供了一种非侵入性和远程定时调节EVs治疗方案以加速组织再生（包括周围神经）的方法。

3.苏州大学陈红教授：利用光热泵贴片高效细胞内高分子定向输送的通用策略

Tang, H., et al. (2023). "Universal Strategy of Efficient Intracellular Macromolecule Directional Delivery Using Photothermal Pump Patch."

Adv Mater: e2304365. IF=29.4

治疗性大分子物质的高效、非破坏性和体内/体外适用的通用递送策略，以期将其递送到所需的细胞和组织中，一直是一个非常具有挑战性的问题。光热方法在细胞内递送方面具有优势，特别是在体内操作方面。然而，外源分子的定向传输能力限制了它们的递送效率。该研究报告了一种带有众多“外源分子储库”的光热泵（PTP）贴片。在激光的作用下，细胞膜破裂，而“外源分子储库”则收缩，导致定向外源分子递送到细胞中，以进行高效的细胞内递送。PTP贴片被认为是一种高效、非破坏性和体内/体外适用的细胞内大分子递送通用结构。在体内经皮细胞内递送条件下，通过PTP贴片和表皮细胞产生的外泌体，目标基因分别被高效、非侵入性地递送到表皮和真皮细胞中。PTP贴片提供了一种新的高效、非破坏性和体内/体外适用的大分子递送策略。

4.中国科学院理化技术研究所樊俊兵：用于增强胶质母细胞瘤化疗的水果源细胞外囊泡工程结构液滴药物

Chen, J., et al. (2023). "Fruit-Derived Extracellular Vesicles Engineered Structural Droplet Drugs for Enhanced Glioblastoma Chemotherapy."

Adv Mater: e2304187. IF=29.4

现有的基于固体纳米颗粒的药物递送系统由于其穿越血脑屏障/血脑肿瘤屏障（BBB/BBTB）的能力较差，对于胶质母细胞瘤化疗仍然是一个巨大的挑战。该研究通过编程水果来源的EVs在DOX@squalene-PBS界面上的自组装，展示了一种水果来源的细胞外囊泡（EVs）工程结构液滴药物（ESDD），极大地增强了其抗胶质母细胞瘤的功效。EVs工程结构液滴药物通过变形放大的巨噬细胞吞噬作用和膜融合经历了灵活的递送，使它们能够高效地穿过BBB/BBTB并深入胶质母细胞瘤组织。正如预期的那样，EVs工程结构液滴药物表现出2.5倍的细胞内摄取、2.2倍的横切转运和5倍的膜融合，比cRGD修饰的EVs高得多，从而允许高效地积累、深入渗透和细胞内吞噬到胶质母细胞瘤组织中，并显著延长胶质母细胞瘤小鼠的生存时间。

5.【综述】温州医科大学纪建松等：间充质干细胞来源的细胞外囊泡在皮肤伤口愈合中的作用、机遇和挑战

Ding, J. Y., et al. (2023). "Mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles in skin wound healing: roles, opportunities and challenges."

Mil Med Res 10(1): 36. IF=21.1

6.北京大学杨瑞莉：硫化氢修饰的M2外泌体通过moesin介导的内吞作用促进骨再生

Zhou, Y. K., et al. (2024). "M2 exosomes modified by hydrogen sulfide promoted bone regeneration by moesin mediated endocytosis."

Bioact Mater 31: 192-205. IF=18.9

7.南通大学：仿生肽支架原位极化和M2巨噬细胞募集促进周围神经再生

Yang, P., et al. (2023). "Bionic peptide scaffold in situ polarization and recruitment of M2 macrophages to promote peripheral nerve regeneration."

Bioact Mater 30: 85-97. IF=18.9

8.暨南大学：FUS介导的HypEV——对缺血性中风的神经保护作用

Wu, Y., et al. (2023). "FUS-mediated HypEVs: Neuroprotective effects against ischemic stroke."

Bioact Mater 29: 196-213.IF=18.9

9.上海交通大学等：双工程软骨靶向源自间充质干细胞的细胞外囊泡通过 miR-223/NLRP3/细胞焦亡轴增强骨关节炎治疗

Liu, W., et al. (2023). "Dual-engineered cartilage-targeting extracellular vesicles derived from mesenchymal stem cells enhance osteoarthritis treatment via miR-223/NLRP3/pyroptosis axis: Toward a precision therapy."

Bioact Mater 30: 169-183. IF=18.9

10.中山大学附属第五医院黄曦教授：由嵌合抗原受体T细胞衍生的外泌体和脂质体组成的顺序靶向混合纳米囊泡，用于增强癌症免疫化疗

Zhu, T., et al. (2023). "Sequential Targeting Hybrid Nanovesicles Composed of Chimeric Antigen Receptor T-Cell-Derived Exosomes and Liposomes for Enhanced Cancer Immunochemotherapy."

ACS Nano. IF=17.1

基于紫杉醇（PTX）化疗仍然是治疗肺癌的主要方法，但全身毒性限制了其使用。由嵌合抗原受体 T 细胞衍生的外泌体包含针对肿瘤的CAR和细胞毒性颗粒（酶 B 和穿孔素），因此被认为是 PTX 的潜在传递载体。然而，外泌体的低药物负载能力和肝靶向性质是其应用于肝外癌症的障碍。因此，设计了一种名为 Lip-CExo@PTX 的混合纳米囊泡，通过将针对介质素（MSLN）和程序性死亡配体-1（PD-L1）的双特异性 CAR-T细胞衍生的外泌体与靶向肺部的脂质体融合，用于肺癌的免疫化疗。由于脂质体的肺部靶向能力，超过 95% 的静脉注射Lip-CExo@PTX 聚集在肺组织中。此外，在抗-MSLN 单链变量片段（scFv）的帮助下，Lip-CExo@PTX 内的 PTX 和细胞毒性颗粒进一步传递到 MSLN 阳性肿瘤中。值得注意的是，Lip-CExo@PTX 上的抗 PD-L1 scFv 阻断了肿瘤上的 PD-L1，以避免 T 细胞耗竭并促进PTX 诱导的免疫原性细胞死亡。此外，Lip-CExo@PTX 延长了 CT-26 转移性肺癌模型中荷瘤小鼠的生存时间。因此，Lip-CExo@PTX 可以通过顺序靶向传递将 PTX 传递到肿瘤细胞，并增强抗肿瘤效果，为肺癌免疫化疗提供了一种有前途的策略。

11.上海交通大学生物医学工程学院丁显廷、余辉：利用动态定量等离子体成像精确鉴定和分析超罕见肿瘤特异性细胞外囊泡的表面蛋白

Zhai, C., et al. (2023). "Precise Identification and Profiling of Surface Proteins of Ultra Rare Tumor Specific Extracellular Vesicle with Dynamic Quantitative Plasmonic Imaging."

ACS Nano. IF=17.1

血浆中的肿瘤来源的外泌体（tEVs）的特异性检测受到非肿瘤来源的外泌体和非外泌体颗粒的干扰，因此需要一种准确识别tEVs并在临床血浆中直接以单个tEV分辨率分析其表面蛋白表达的方法。该研究提出了一种动态免疫分析技术，用于单个tEV表面蛋白分析（DISEP），这是一种基于表面等离子共振显微镜（SPRM）的动力学检测方法，用于特异性单个tEV分析。DISEP采用一对低亲和力寡核苷酸探针分别标记EV表面蛋白并功能化SPRM生物传感器界面。使用寡核苷酸探针标记的tEVs具有与血浆中非特异性颗粒不同的结合动力学，这使得可以准确地对单个EV进行数字光学计数。研究证明了DISEP可以在350倍背景血浆颗粒中识别目标EVs，并具有高灵敏度（每μL 4677 EVs）。使用EpCAM、HER2和GPC1生物标志物，对临床血浆样本进行了分析，以区分胰腺癌患者（n = 40）和健康供体（n = 45）。DISEP仅需要每个供体10μL原始样品即可对肿瘤患者进行分类，其曲线下面积为0.98。DISEP提供了一种高度特异性的EV检测和表面蛋白分析策略，可用于早期癌症诊断。

四川大学：用于超声增强肌腱基质重建和免疫微环境调节的细胞外囊泡包裹的多面生物催化剂

Rong, X., et al. (2023). "An Extracellular Vesicle-Cloaked Multifaceted Biocatalyst for Ultrasound-Augmented Tendon Matrix Reconstruction and Immune Microenvironment Regulation."

ACS Nano. IF=17.1

第四军医大学：工程细胞外囊泡递送的CRISPR/Cas9用于胶质母细胞瘤放射治疗增敏

Liu, X., et al. (2023). "Engineered Extracellular Vesicle-Delivered CRISPR/Cas9 for Radiotherapy Sensitization of Glioblastoma."

ACS Nano.IF=17.1

放射治疗是胶质母细胞瘤（GBM）治疗的主要手段；然而，治疗抵抗力的发展阻碍了放射治疗的疗效，这表明需要额外的治疗策略。在小鼠正位移植肿瘤接受放射治疗的情况下，进行了体内功能丧失基因组范围CRISPR筛选，以识别与放射治疗相关的合成致死基因。使用功能筛选和转录组分析，发现谷胱甘肽合成酶（GSS）通过铁死亡调节剂可能是放射抵抗性的潜在调节因子。高GSS水平与胶质瘤患者的预后不良和复发密切相关。机制研究表明，GSS与胶质瘤细胞中放射治疗诱导的铁死亡抑制有关。GSS耗竭导致谷胱甘肽（GSH）合成紊乱，从而导致GPX4失活和铁积累，从而增强了放射治疗诱导的铁死亡。此外，为了克服CRISPR编辑广泛治疗转化面临的障碍，该研究报道了一种以Cas9蛋白/sgRNA复合物为载体的基因组编辑递送系统，该系统被装载到Angiopep-2（Ang）和转录激活剂（TAT）肽双修饰的细胞外囊泡（EV）中，不仅靶向血脑屏障（BBB）和GBM，而且渗透BBB并穿透肿瘤。该研究的包装EVs显示出GBM组织靶向的令人鼓舞的迹象，这导致GBM中高GSS基因编辑效率（高达67.2％），并且几乎没有非靶向基因编辑。这些结果表明，无偏基因筛选和CRISPR-Cas9基因治疗相结合可用于识别潜在的合成致死基因，并进一步确定治疗靶点。

第四军医大学：体内观察源自内皮细胞的细胞外囊泡表明通过聚集诱导发射发光剂改善了缺血性中风后的星形胶质细胞功能

Gao, X., et al. (2023). "Observing Extracellular Vesicles Originating from Endothelial Cells in Vivo Demonstrates Improved Astrocyte Function Following Ischemic Stroke via Aggregation-Induced Emission Luminogens."

ACS Nano 17(16): 16174-16191. IF=17.1

南京农业大学王源超教授：四跨膜蛋白的不同序列使植物能够特异性识别微生物来源的细胞外囊泡

Zhu, J., et al. (2023). "Divergent sequences of tetraspanins enable plants to specifically recognize microbe-derived extracellular vesicles."

Nat Commun 14(1): 4877. IF=16.6

细胞外囊泡（EV）在动物的细胞间通讯中起着重要作用。EV在植物-微生物相互作用中也发挥着重要作用，但其潜在机制仍然不清楚。该研究对大豆（Glycine max）根腐病原菌Phytophthora sojae的EV进行蛋白质组学分析，鉴定了四跨膜蛋白家族蛋白PsTET1和PsTET3，这些蛋白被Nicotiana benthamiana识别以触发植物免疫反应。这两种蛋白对P. sojae的完全毒力都是必需的。PsTET3的大型细胞外环（EC2）是N. benthamiana和大豆细胞以植物受体样激酶NbSERK3a / b依赖方式识别的关键区域。来自卵菌和真菌植物病原体的TET蛋白被N. benthamiana识别，从而诱导免疫反应，而由植物衍生的TET蛋白则不是由于EC2 C端的十六个氨基酸序列分歧。这个特征使植物能够区分自身和非自身EV以触发对致病真核生物的主动防御反应。

武汉大学闫卫教授：癌细胞分泌的miR-204-5p诱导白色脂肪组织中的瘦素信号通路，促进癌症相关的恶病质

Hu, Y., et al. (2023). "Cancer-cell-secreted miR-204-5p induces leptin signalling pathway in white adipose tissue to promote cancer-associated cachexia."

Nat Commun 14(1): 5179. IF=16.6

癌症相关消瘦症是一种多器官体重减轻综合征，尤其是脂肪组织和骨骼肌的消耗性疾病。小型细胞外囊泡（sEV）作为新兴信使连接原发肿瘤和代谢器官以施加系统调节。然而，肿瘤来源的sEV是否以及如何调节白色脂肪组织（WAT）棕变和脂肪流失尚未明确定义。该研究报告乳腺癌细胞分泌的外泌体miR-204-5p通过靶向von Hippel-Lindau（VHL）基因在WAT中诱导缺氧诱导因子1A（HIF1A）。升高的HIF1A蛋白诱导了瘦素信号通路，从而增强了WAT中的脂解作用。此外，外源性VHL表达阻断了外泌体miR-204-5p对WAT棕变的影响。在缺乏癌症来源miR-204-5p分泌的小鼠中检测到降低的血浆磷脂酰乙醇胺水平。总之，该研究揭示了循环miR-204-5p诱导缺氧介导的瘦素信号通路以促进脂解和WAT棕变，为癌症相关消瘦症的预防筛查和早期干预提供了启示。

中国科学院分子植物科学卓越创新中心王四宝研究员：蚊子共生体的外膜囊泡通过磷脂酰胆碱清除途径介导靶向杀死疟原虫寄生虫

Gao, H., et al. (2023). "Outer membrane vesicles from a mosquito commensal mediate targeted killing of Plasmodium parasites via the phosphatidylcholine scavenging pathway."

Nat Commun 14(1): 5157. IF=16.6

肠道微生物群是调节蚊子疟疾感染的重要调节因素，包括抗疟效应蛋白的产生。但共生衍生效应蛋白如何转位到疟原虫中仍然不清楚。本文显示，一种自然的疟原虫阻滞共生菌Serratia ureilytica Su_YN1通过外膜囊泡（OMVs）向疟原虫传递效应器脂肪酶AmLip。在进食血液后，宿主血清强烈诱导Su_YN1释放OMVs和抗疟效应蛋白AmLip到蚊子的肠道中。AmLip首先通过T1SS分泌到细胞外空间，然后优先装载在选择性靶向疟原虫的OMVs上，从而导致对寄生虫的有针对性杀死。值得注意的是，这些血清诱导的OMVs包含某些血清衍生的脂质，例如磷酰胆碱，这对于Plasmodium通过磷酰胆碱清除途径吞噬OMV至关重要。这些发现揭示了这种肠道共生菌进化成以细胞外囊泡形式传递分泌效应分子以有针对性地攻击寄生虫并使蚊子对Plasmodium感染产生抵抗力。发现了来自共生菌的OMVs作为携带者在蚊子微生物群与Plasmodium寄生虫之间的跨界通讯中的作用，提供了一种阻止疟疾传播的潜在创新策略。

香港大学Judy Wai Ping Yam团队：富含网格蛋白轻链A的EV重塑微血管生态位诱导肝细胞癌转移

Xu, Y., et al. (2023). "Clathrin light chain A-enriched small extracellular vesicles remodel microvascular niche to induce hepatocellular carcinoma metastasis."

J Extracell Vesicles 12(8): e12359. IF=16

前期报道：https://www.exosomemed.com/14965.html

中国科学院深圳先进技术研究院涂文伟研究员：基于源自γδ-T细胞的细胞外囊泡的肿瘤疫苗具有双重抗肿瘤活性

Wang, X., et al. (2023). "Tumor vaccine based on extracellular vesicles derived from γδ-T cells exerts dual antitumor activities."

J Extracell Vesicles 12(9): e12360. IF=16

γδ-T细胞是具有双重抗肿瘤活性的类固醇T细胞。它们可以直接消灭肿瘤细胞并作为免疫刺激细胞促进抗肿瘤免疫。以前的研究表明，γδ-T细胞（γδ-T-EVs）来源于小型细胞外囊泡（EVs），从其母细胞继承了双重抗肿瘤活性。然而，γδ-T-EVs是否可以被设计成肿瘤疫苗以提高治疗效果仍然未知。该研究发现γδ-T-EVs对抗原提呈细胞具有免疫佐剂效应，表现为增强的抗原提呈和共刺激分子表达、促炎性细胞因子分泌和DCs的抗原提呈能力。将肿瘤相关抗原（TAAs）装载到γδ-T-EVs中设计了γδ-T-EVs基础疫苗。与γδ-T-EVs相比，γδ-T-EVs基础疫苗有效地促进了更多的肿瘤特异性T细胞反应。此外，该疫苗方案保留了直接的抗肿瘤效应并诱导了肿瘤细胞凋亡。有趣的是，同种异体γδ-T-EVs基础疫苗显示出与自体对照相当的预防和治疗抗肿瘤效果，表明在临床实践中有更好的集中化和标准化方式。此外，同种异体γδ-T-EVs基础疫苗通过其双重抗肿瘤活性显示出优势于DC-EVs基础疫苗。这项研究为使用同种异体γδ-T-EVs基础疫苗控制癌症提供了概念证明。

上海交通大学生物医学工程学院丁显廷：在4小时内用10 µL外周血浆分析细胞外囊泡表面蛋白

He, J., et al. (2023). "Profiling extracellular vesicle surface proteins with 10 µL peripheral plasma within 4h."

J Extracell Vesicles 12(9): e12364. IF=16

21. 南昌大学：绿原酸通过调节肠道微生物的细胞外囊泡改善感染后肠易激综合症

Zheng, C., et al. (2023). "Chlorogenic Acid Ameliorates Post-Infectious Irritable Bowel Syndrome by Regulating Extracellular Vesicles of Gut Microbes."

Adv Sci (Weinh): e2302798. IF=15.1

河北医科大学：外泌体转移的LINC00668通过促进炎症性肠病中NET的形成而导致血栓形成

Zhang, L., et al. (2023). "Exosomes-transferred LINC00668 Contributes to Thrombosis by Promoting NETs Formation in Inflammatory Bowel Disease."

Adv Sci (Weinh): e2300560. IF=15.1

南方医科大学吴耀彬：可注射的光固化Janus水凝胶提供hiPSC心肌细胞衍生的外泌体，用于减少心脏手术后粘连

Wang, L., et al. (2023). "Injectable photocurable Janus hydrogel delivering hiPSC cardiomyocyte-derived exosome for post-heart surgery adhesion reduction."

Sci Adv 9(31): eadh1753. IF=13.6