本周hzangs在最新文献中选取了9篇分享给大家，第1篇文章强调了肿瘤细胞培养上清分离的细胞外囊泡以及与细胞外囊泡共分离的内源性逆转录病毒具有不同的免疫调节特性，提示未来研究中需要注意与细胞外囊泡共分离的活性颗粒对研究结论的影响；第2篇文章提出了一种过滤外周血，从而去除循环肿瘤细胞和肿瘤细胞外囊泡的策略，用于肿瘤复发转移的防治；第3篇文章开发了一种标记细胞内膜结构的策略用于分析外泌体的生物起源；第4篇文章讨论了MSC及其产生的外泌体的GMP前景和目前的问题；第6篇文章介绍了一种去除血清中脂蛋白颗粒，提高外泌体纯度的策略。
1.Extracellular vesicles and co-isolated endogenous retroviruses from murine cancer cells differentially affect dendritic cells. 从鼠癌细胞培养液中分离的细胞外囊泡和共同分离的内源性逆转录病毒对树突状细胞的影响不同。[EMBO J] PMID: 38073509摘要：细胞分泌可能在细胞间通讯中发挥作用的细胞外囊泡 (EV) 和非囊泡细胞外（纳米）颗粒（NVEP 或 ENP）。肿瘤来源的 EV 已被提议用于诱导抗原呈递细胞的免疫启动或作为免疫抑制剂。我们怀疑这种不同的功能是由于 EV 亚型和 ENP 的不同组成造成的。我们的目的是表征鼠肿瘤细胞系分泌的 EV 和 ENP 的阵列。出乎意料的是，我们在许多肿瘤细胞产生的 EV 制剂中发现了来自内源性鼠白血病病毒的病毒样颗粒 (VLP)。我们建立了一个流程，将小型细胞外囊泡与 VLP 和 ENP 分开。我们比较了它们的蛋白质组成并分析了它们与目标树突细胞的功能相互作用。 ENP 的捕获效果很差，并且不影响树突状细胞。小型细胞外囊泡专门诱导树突状细胞死亡。混合的大/致密 EV/VLP 制剂最有效地诱导树突状细胞成熟和抗原呈递。我们的结果要求系统地重新评估小鼠肿瘤产生的非病毒EV和VLP各自的比例和功能及其对肿瘤进展的贡献。
2.A Pro-Metastatic Derivatives Eliminator for In Vivo Dual-Removal of Circulating Tumor Cells and Tumor-Derived Exosomes Impedes their Biodistribution into Distant Organs. 一种促转移衍生物消除剂，用于体内双重去除循环肿瘤细胞和肿瘤源性外泌体，阻止它们分布到远处器官。[Adv Sci (Weinh)] PMID: 37867235摘要：循环肿瘤细胞（CTC）和肿瘤源性外泌体（TDE）在转移级联中发挥着不可替代的作用，阻止它们通过血液循环到达远处器官有助于降低癌症复发和转移的可能性。然而，能够同时阻止 CTC 和 TDE 到达远处器官的技术迄今为止尚未得到彻底开发。在这里，受血液灌流的启发，开发了一种促转移衍生物消除器（PMDE），用于从外周血中去除 CTC 和 TDE，这也抑制了它们在远端器官中的生物分布。该装置的设计是将双抗体修饰的免疫吸附剂填充到捕获柱中，将外周血抽出体外，流经柱以特异性捕获CTC和TDE，然后将纯化的血液回输到体内。 PMDE能有效去除外周血中的CTC和TDE，并具有良好的生物相容性。PMDE装置可以通过清除CTC和TDE在肺和肝脏中显着抑制它们的生物分布。该工作为抗转移治疗提供了新的视角，在预防复发转移的临床应用中具有广阔的前景。
3.Metabolic labelling of a subpopulation of small extracellular vesicles using a fluorescent palmitic acid analogue. 使用荧光棕榈酸类似物对小细胞外囊泡亚群进行代谢标记。[J Extracell Vesicles] PMID: 38072803摘要：外泌体是细胞间通讯最令人关注的载体之一，但其生物发生的几个关键方面仍然难以捉摸，这主要是由于难以纯化具有相似大小和密度的囊泡。在这里，我们报告了一种使用荧光棕榈酸类似物 Bodipy FL C16 标记小细胞外囊泡 (sEV) 的有效方法。在这项研究中，我们提出了令人信服的证据，证明源自 Bodipy C16 标记细胞的荧光 sEV 群体代表了遵循细胞内途径的外泌体的离散亚群。 Bodipy C16 的快速细胞摄取和代谢导致荧光磷脂掺入细胞内细胞器中，特别排除质膜，并最终成为外泌体膜的一部分。重要的是，我们的荧光标记方法促进了外泌体的准确定量和表征，克服了非特异性染料掺入异质囊泡群体的限制。 Bodipy 标记的外泌体的表征揭示了它们富含四跨膜蛋白标记物，特别是 CD63 和 CD81，以及少量的 CD9。此外，我们采用 nanoFACS 分选和电子显微镜来确认 Bodipy 标记的囊泡的外泌体性质。这种基于脂肪酸命运的创新代谢标记方法为研究各种生理和病理背景下的外泌体生物发生和功能特性提供了新途径。
4.Translating mesenchymal stem cell and their exosome research into GMP compliant advanced therapy products: Promises, problems and prospects. 将间充质干细胞及其外泌体研究转化为符合 GMP 的先进治疗产品：问题和前景。[Med Res Rev] PMID: 38095832摘要：间充质干细胞（MSC）由于其独特的旁分泌能力、多重分化潜力、外泌体中的活性成分和有效的线粒体贡献，是临床实践中用作免疫调节和缺血组织修复治疗剂的少数干细胞类型之一。目前，源自骨髓、脐带等组织的间充质干细胞广泛应用于临床前和临床研究。然而，维持来自不同供体或组织的始终如一的高质量 MSC 仍然存在挑战，直接影响其作为先进治疗产品的应用。在这篇综述中，我们讨论了将MSC 研究转化为药品的问题和前景。我们回顾了将 MSC 和MSC 外泌体从研究平台转化为符合良好生产规范 (GMP) 的先进治疗产品过程中遇到的障碍。这些困难包括如何建立符合 GMP 的方案、哪些因素影响原材料选择、细胞扩增到产品配方、质量控制 (QC) 参数的建立以及符合 GMP 标准的质量保证。为了避免人为错误并降低污染风险，应考虑使用能够实时监控 QC 的自动封闭系统。我们还强调了多能干细胞作为 MSC 和外泌体生成和制造的替代来源的潜在优势。
5.Altered In vivo early neurogenesis traits in patients with depression: Evidence from neuron-derived extracellular vesicles and electroconvulsive therapy. 抑郁症患者体内早期神经发生特征的改变：来自神经元源性细胞外囊泡和电休克治疗的证据。[Brain Stimul] PMID: 38101468摘要：神经发生假说是抑郁症一个有前景的候选病因学假说，它与电休克治疗（ECT）相关。然而，缺乏人体体内分子水平的证据。我们使用神经元源性细胞外囊泡（NDEV）作为“神经元的窗口”，探讨难治性抑郁症（TRD）患者与 ECT 相关的体内神经发生状态。在这项研究中，我们招募了 40 名 TRD 患者和 35 名健康对照 (HC)。我们从每位参与者的血浆中分离出 NDEV，以测试双皮质素 (DCX)（神经发生标记物）和分化簇 (CD) 81（EV 标记物）的水平。我们还评估了脑源性神经营养因子 (BDNF) 的血浆水平，这是一种已知与 ECT 和神经塑性过程相关的蛋白质。我们的研究结果表明，TRD 患者的 NDEV 中的 DCX 水平和血浆中的BDNF 水平在基线时均显着低于 HC，但在 ECT 后有所增加。相反，TRD 患者的 NDEV 中 CD81 水平在基线时较高，但在 ECT 治疗后没有变化。探索性分析显示，血浆中 BDNF 水平较低，NDEV 中 DCX 水平较低，以及NDEV 中 CD81 水平较高，与基线时更严重的抑郁症状和认知功能下降相关。此外，NDEV 中较高的基线 CD81 浓度与抑郁症状的更大程度减轻相关。
6.Chemically-Induced Lipoprotein Breakdown for Improved Extracellular Vesicle Purification. 化学诱导脂蛋白分解以改善细胞外囊泡纯化。[Small] PMID: 38100284摘要：细胞外囊泡（EV）是参与细胞间通讯的纳米级生物分子包。 EV 由所有细胞释放，使其广泛用作（病理）生理学中的治疗、诊断和机制成分。样品纯度对于正确地将观察到的效应归因于 EV 以及最大限度地提高治疗和诊断性能至关重要。脂蛋白污染物是样品纯度面临的主要挑战。血液循环中的脂蛋白含量较EV大约丰富六个数量级，并且在大小、形状和密度上与 EV 重叠。这项研究代表了基于化学诱导脂蛋白分解的 EV 纯化方法的第一个例子。具体来说，苯乙烯-马来酸（SMA）共聚物用于选择性分解脂蛋白，从而能够随后根据大小从血浆中分理处细胞外囊泡。使用聚合物，然后进行切向流过滤或尺寸排阻色谱，可以提高 EV 产量、保留 EV 形态、增加EV 标记并减少污染物标记。基于 SMA 的 EV 纯化可以改进荧光标记，减少与巨噬细胞的相互作用，并提高检测 EV 生物标志物的准确性、灵敏度和特异性，这表明对各种下游应用的好处。总之，SMA 是一种简单有效的方法，可以提高等血清衍生细胞外囊泡的纯度和产量，这对下游应用产生了有利的影响。
7.Multiomic integration reveals neuronal-extracellular vesicle coordination of gliotic responses in degeneration. 多组学整合揭示了神经元-细胞外囊泡在退行性变性过程中神经胶质细胞反应的协调。[J Extracell Vesicles] PMID: 38082562摘要：在中枢神经系统 (CNS)（包括视网膜）中，神经元与神经胶质的通讯对于维持组织稳态（包括信号传输、营养因子的转移和炎症调节）至关重要。细胞外囊泡（EV）介导的分子信息传输来调节这些过程已被认为是神经元和神经胶质细胞之间可以发生双向通信的机制。在这项工作中，我们采用多组学整合来研究中枢神经系统内从神经元到神经胶质细胞的 EV 通信途径的作用，使用小鼠视网膜作为易于接近的代表性中枢神经系统组织。此外，利用成熟的变性模型，我们旨在揭示神经元和神经胶质细胞之间通过 EV 进行的稳态消息传递失调如何导致视网膜和神经退行性疾病。进行了 EV 蛋白质组学、神经胶质细胞 microRNA (miRNA) 开放阵列和小 RNA 测序以及视网膜单细胞测序，并通过计算整合和分析了数据集。结果表明，神经元 miRNA 向神经胶质细胞的外源转移是由 EV 介导的，并且作为变性过程中的靶向反应而发生，以调节神经胶质炎症。总而言之，我们的结果支持通过 EV 进行神经元与神经胶质细胞通讯的模型，该模型可用于靶向治疗，以减缓中枢神经系统视网膜和神经变性的进展。
8.Proteomic comparison between non-purified cerebrospinal fluid and cerebrospinal fluid-derived extracellular vesicles from patients with Alzheimer's, Parkinson's and Lewy body dementia. 阿尔茨海默病、帕金森病和路易体痴呆患者的未纯化脑脊液和脑脊液来源的细胞外囊泡之间的蛋白质组比较。[J Extracell Vesicles] PMID: 38082559摘要：痴呆症是全球主要死亡原因，随着全球预期寿命的延长，其患病率也不断增加。最常见的神经退行性疾病是阿尔茨海默病（AD）、路易体痴呆（DLB）和帕金森病痴呆（PDD）。通过这项研究，我们深入研究了 AD、PD、PD-MCI（患有轻度认知障碍的帕金森病）的（未纯化的）脑脊液 (CSF) 和 CSF 衍生的细胞外囊泡 (EV) 的蛋白质组。这导致了差异表达蛋白的发现，可能有助于鉴别诊断。与非纯化的CSF (N = 169) 相比，我们在 CSF 衍生的 EV样本 (N = 276) 中观察到更多数量的差异表达蛋白，两个数据集之间的重叠很小。这一发现表明，脑脊液衍生的 EV 样本可能更适合生物标志物研究的发现阶段，因为更丰富的蛋白质可以是波动范围更窄。作为疾病特异性标记物，我们总共选择了在未纯化的 CSF 中鉴定的 39 个候选生物标记物，以及在 CSF 衍生的 EV 数据中研究的不同疾病的 37 个候选生物标记物。经过对这些蛋白质的进一步探索和验证，它们可用于进一步区分所包括的痴呆症，并可能为研究更多疾病特异性药物治疗提供新途径。
9.Extracellular vesicle proteome unveils cathepsin B connection to Alzheimer's disease pathogenesis. 细胞外囊泡蛋白质组揭示了组织蛋白酶 B 与阿尔茨海默病发病机制的关系。[Brain] PMID: 38071653摘要：细胞外囊泡（EV）是在细胞释放的膜囊泡，被认为与包括阿尔茨海默氏病在内的神经退行性疾病的发病机制有关。在这里，对 16 个 ATN 分类病例的 CSF EV 进行了定量蛋白质组分析。在这些 CSF EV 中，11 种蛋白质的水平在 ATN 阶段转变期间显着改变（P < 0.05 且倍数变化 > 2.0）。这些蛋白质被认为与阿尔茨海默病的发病机制有关，并代表了致病阶段分类的候选生物标志物。对 CSF 和血浆 EV 的酶联免疫吸附测定分析显示，ATN 转变期间组织蛋白酶 B (CatB) 的水平发生了变化（验证集中有 7 个 ATN 组，n = 136）。 CSF 和血浆 EV CatB 水平与CSF 淀粉样蛋白-β42 浓度呈负相关。 ATN 分类中 CSF EV 的蛋白质组图谱可以描绘阿尔茨海默病进展的分子框架，而 CatB 可能被认为是阿尔茨海默病淀粉样蛋白病理学中有前途的候选生物标志物和治疗靶点。
今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！
