本周hzangs在最新文献中选取了11篇分享给大家，第1篇文章介绍了基于Cas12的一种等温扩增方法用于监测细胞外囊泡miRNA；第2篇文章介绍了植物细胞来源的囊泡通过传递mRNA并在病原菌内翻译从而抑制病原菌侵染的机制；第3篇文章介绍了细胞外囊泡蛋白冠在免疫细胞摄取过程中的作用；第4篇文章讨论了细胞外囊泡进出血管的机制；第11篇文章探讨了提高血液细胞外囊泡研究可重复性所需要的一些实验安排。
1.A one-pot isothermal Cas12-based assay for the sensitive detection of microRNAs.
一种基于 Cas12 的等温测定法，用于灵敏检测 microRNA。
[Nat Biomed Eng] PMID: 37106152
摘要：由于缺乏准确、快速且廉价的生物体液检测方法，microRNA 作为临床癌症生物标志物的使用受到阻碍。在这里，我们报告了一种一步等温测定，利用滚环扩增和核酸内切酶 Cas12a 来准确检测特定 miRNA。该测定利用 Cas12a 的顺式切割活性来实现目标序列的指数滚环扩增及其反式切割活性，以进行检测和信号放大。在胰腺导管腺癌患者的血浆中，该检测检测到细胞外囊泡中的 miRNA miR-21、miR-196a、miR-451a 和 miR-1246，浓度为个位数飞摩尔浓度，具有单核苷酸特异性。该检测速度快（从样品到结果的时间范围为 20 分钟到 3 小时），不需要专门的仪器，并且与基于智能手机的荧光检测和用于视觉读数的侧流格式兼容。检测血液中 miRNA 的简单测定可能有助于开发 miRNA 作为癌症诊断和预后的生物标志物。
2.Plant mRNAs move into a fungal pathogen via extracellular vesicles to reduce infection.
植物 mRNA 通过细胞外囊泡进入真菌病原体以减少感染。
[Cell Host Microbe] PMID: 38103543
摘要：宿主和微生物之间的跨界小 RNA 运输调节感染过程中相互作用伙伴的基因表达。然而，其他 RNA 是否也被转移尚不清楚。在这里，我们发现宿主植物拟南芥通过细胞外囊泡 (EV) 将 mRNA 传递到真菌病原体灰葡萄孢中。荧光 RNA 适体报告器西兰花系统揭示了 EV 和受体真菌细胞中的宿主 mRNA。使用翻译核糖体亲和纯化分析和多核糖体分析，我们观察到递送的宿主 mRNA 在真菌细胞中被翻译。灰霉病菌中两种转移宿主 mRNA 的异位表达表明它们的蛋白质对感染有害。与这些转移的 mRNA 相对应的基因的拟南芥敲除突变体更容易受到影响。因此，植物有一种通过将 mRNA 转运到真菌细胞中来减少感染的策略。从植物转移到病原真菌的 mRNA 被翻译来削弱感染，从而提供有助于对抗作物病害的知识。
3.Uptake of extracellular vesicles into immune cells is enhanced by the protein corona.
蛋白冠增强了免疫细胞对细胞外囊泡的摄取。
[J Extracell Vesicles] PMID: 38124271
摘要：过去几年的各种出版物已经证明了蛋白质冠对细胞中纳米颗粒摄取的影响。细胞外囊泡（EV）可以被视为天然纳米颗粒。然而，EV 是在不同的细胞培养条件下产生的，并且人们对 EV 上形成的蛋白冠及其对靶细胞摄取的影响知之甚少。在这里，我们使用蛋白质组学方法来分析 EV 本身的蛋白质组成以及 EV 周围的人血浆蛋白冠的蛋白质组成。此外，我们分析了蛋白冠对人类单核细胞摄取 EV 的影响，并将其与工程脂质体摄取的影响进行比较。我们发现蛋白冠的存在会增加人类单核细胞对 EV 的摄取。对于脂质体来说，这似乎是由蛋白冠中免疫球蛋白的存在引发的，而对于阻断单核细胞上 Fc 受体的 EV 来说，并没有显示出吸收的影响。因此，最有可能涉及与细胞膜对接和摄取的其他机制，这证明了 EV 和脂质体作为技术生产的纳米载体之间的明显区别。
4.Entry and exit of extracellular vesicles to and from the blood circulation.
细胞外囊泡进出血液循环。
[Nat Nanotechnol] PMID: 38110531
摘要：细胞外囊泡 (EV) 是生物纳米颗粒，通过短距离和长距离输送生物活性物质来促进细胞间通讯。短距离通信发生在间质中，而长距离通信被认为需要通过血液循环传输才能到达远端部位。细胞外囊泡治疗药物经常进行全身注射，诊断方法通常依赖于血液中器官来源的 EV 的检测。然而，人们对EV进入和退出循环的机制知之甚少。在这里，淋巴系统和通过细胞旁和跨细胞途径穿过内皮屏障的运输被讨论为 EV 进入和退出血液循环系统的潜在途径。
5.Pleiotropic effects of extracellular vesicles from induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes on ischemic cardiomyopathy: A preclinical study.
诱导多能干细胞来源的心肌细胞外囊泡对缺血性心肌病的多效性作用：临床前研究。
[J Heart Lung Transplant] PMID: 37611882
摘要：干细胞分泌的细胞外囊泡（EV）在缺血性心脏病动物模型中的细胞间通讯和恢复心脏功能中发挥重要作用。然而，很少有研究使用来自临床级干细胞及其衍生物的质量稳定的EV。此外，关于EV治疗从急性期到慢性期的多因素作用的机制和时间过程、受影响的细胞以及作用是直接还是间接的信息很少。使用临床级分化诱导系统产生诱导多能干细胞来源的心肌细胞（iPSCM）。通过超速离心从条件培养基中分离出 EV，并在计算机、体外和体内进行表征。通过结扎左前降支建立大鼠心肌梗死模型，并用 iPSCM 衍生的 EV 治疗。iPSCM衍生的 EV 含有与血管生成、抗纤维化、促进 M2 巨噬细胞极化、细胞增殖和抗凋亡相关的 microRNA 和蛋白质。 iPSCM 衍生的 EV 治疗通过改善血管形成并抑制心脏纤维化和慢性炎症，改善了大鼠模型的左心室功能并降低了死亡率。EV被心脏组织中的心肌细胞、内皮细胞、成纤维细胞和巨噬细胞摄取。多效性效应的发生是由于封装在 EV 中的 microRNA 和蛋白质的直接作用以及对 M2 巨噬细胞的间接旁分泌作用。综上所述，我们研究表明临床级 iPSCM 衍生的 EV 通过调节各种细胞类型中的各种基因和通路来改善心脏功能，并可能具有治疗缺血性心脏病的临床潜力。
6.Nanoprojectile Secondary Ion Mass Spectrometry Enables Multiplexed Analysis of Individual Hepatic Extracellular Vesicles.
纳米弹二次离子质谱能够对单个肝细胞外囊泡进行多重分析。
[ACS Nano] PMID: 38033295
摘要：细胞外囊泡（EV）是细胞分泌的纳米级脂质双层颗粒。EVs可能携带起源组织及其疾病状态的标记，这使得它们在疾病诊断和监测方面具有令人难以置信的前景。虽然EV分析技术的装备正在迅速扩大，但仍然强烈需要具有单一EV分辨率的多参数分析。纳米弹丸 (NP) 二次离子质谱 (NP-SIMS) 依赖于在时间和空间上解析的单个金纳米粒子轰击感兴趣的基质。每个射弹都会形成一个直径为 10-20 nm 的撞击坑，同时对每次撞击发射的分子进行质量分析并记录为单独的质谱。我们展示了 NP-SIMS 对源自正常肝细胞（肝细胞）和肝癌细胞的单个 EV 进行统计分析的实用性。EV 在抗体 (Ab) 功能化的金底物上捕获，然后用携带镧系元素 (Ln) MS 标签的 Ab 进行标记(Ab@Ln)。这些标签针对用于识别所有 EV 的四个标记物，并且特定于肝细胞或肝癌。NP-SIMS 用于检测同一 EV 上共定位的 Ab@Ln 标签，并构建数千个 EV 的表面标记表达散点图，并具有对单个 EV 进行分类的能力。此外，NP-SIMS 揭示了有关目标部分共定位的化学纳米环境的信息。我们的方法允许使用单一 EV 分辨率分析群体异质性，并根据表面标志物表达区分肝细胞和肝癌 EV。NP-SIMS 对于单个 EV 的多重分析具有很大的前景，并且可能成为识别和验证癌症和其他疾病的 EV 生物标志物的有价值的工具。
7.Simultaneously targeting extracellular vesicle trafficking and TGF-β receptor kinase activity blocks signaling hyperactivation and metastasis.
同时靶向细胞外囊泡运输和 TGF-β 受体激酶活性可阻断信号传导过度激活和转移。
[Signal Transduct Target Ther] PMID: 38105247
摘要：转移是癌症相关死亡的主要原因。转化生长因子β（TGF-β）信号传导可驱动转移，并在癌症进展过程中强烈增强。然而，使用靶向 TGF-β 信号传导抑制剂治疗癌症患者仍然不成功，这凸显了对 TGF-β 生物学理解的差距，限制了有效抗转移疗法的建立。在这里，我们发现乳腺癌细胞中 TGF-β 信号过度激活是转移所必需的，并且依赖于小细胞外囊泡 (sEV) 分泌的增加。sEV 诱导的 TGF-β 信号传导水平超过了相应浓度的可溶性配体 TGF-β 的活性，这证明了 sEV 的独特作用。此外，抑制高度转移性乳腺癌细胞中的 sEV 通过将 TGF-β 信号传导降低至接近正常水平来损害癌细胞的侵袭性。另外，非侵袭性乳腺癌细胞中的 TGF-β 信号活性本来就很低，但可以通过 sEV 放大，从而使转移性差的乳腺癌细胞能够侵袭和转移。二甲阿米洛利 (DMA) 治疗可减少 sEV 分泌、TGF-β 信号活性和体内乳腺癌进展，这强调了抑制晚期乳腺癌中 sEV 运输的转化潜力。通过以次优剂量组合 DMA 和 SB431542 来靶向sEV 运输和 TGF-β 信号传导增强了这种效果，使原发性肿瘤中的 TGF-β 信号传导正常化，从而有效减少循环肿瘤细胞、转移和肿瘤自身播种。总的来说，这项研究将 sEV 确立为 TGF-β 生物学的关键元素，证明了抑制 sEV 运输作为一种通过使乳腺癌细胞中 TGF-β 信号水平正常化来损害转移的新治疗方法的可行性。
8.Immunogenic Extracellular Vesicles Derived from Endoplasmic Reticulum-Stressed Tumor Cells: Implications as the Therapeutic Cancer Vaccine.
内质网应激肿瘤细胞衍生的免疫原性细胞外囊泡：作为治疗性癌症疫苗的意义。
[ACS Nano] PMID: 38109681
摘要：肿瘤源性细胞外囊泡（TDE）具有治疗性癌症疫苗应用的潜力，因为它们天生具有肿瘤相关抗原，介导抗原呈递，并且可以掺入免疫佐剂以增强疫苗功效。然而，最初的 TDE 也含有免疫抑制蛋白。为了解决这个问题，我们提出了一种简单而强大的预处理方法来提高 TDE 的整体免疫原性。该方法涉及通过衣霉素抑制 N-糖基化来诱导亲本肿瘤细胞的内质网 (ER) 应激。生成的免疫原性TDE（iTDE）含有下调的免疫抑制蛋白和上调的免疫佐剂，可在体外有效激活树突状细胞（DC）。此外，来自荷瘤小鼠模型的体内证据表明，iTDE 激活 DC，使细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL) 能够靶向肿瘤，并最终建立全身抗肿瘤免疫反应。此外，与对照组相比，iTDE 在术后模型中显着延迟了肿瘤复发。这些发现凸显了我们利用 TDE 开发有效癌症疫苗的战略的巨大潜力。
9.Simultaneous ischemic regions targeting and BBB crossing strategy to harness extracellular vesicles for therapeutic delivery in ischemic stroke.
同时靶向缺血区域和血脑屏障交叉策略，利用细胞外囊泡治疗缺血性中风。
[J Control Release] PMID: 38109946
摘要：脂肪干细胞（ADSC-EV）衍生的细胞外囊泡（EV）在缺血性中风治疗方面具有广阔的前景，但由于靶向能力不足，其治疗效果受到极大限制。之前的报道主要集中于单一缺血靶向或血脑屏障（BBB）穿透，但尚未充分考虑到脑实质的精确递送。这项研究利用 RGD 肽的靶向能力和 Angiopep-2 肽的细胞穿透能力，将 ADSC-EV 精确地输送到受损的脑实质。我们发现，双重修饰的EV（RA-EV）在体外显着增强了跨BBB的跨细胞通透性，不仅靶向缺血血管，而且在体内静脉注射后在缺血病变区域实现了快速积累。 RA-EV 进一步减少了梗塞体积、细胞凋亡、BBB 破坏和神经行为缺陷。RNA测序揭示了给药后的分子调控机制。这些发现表明，双重修饰优化了脑实质靶向，并强调了募集和渗透作为先前未确定的利用 EV 治疗缺血性中风的策略的重要性。
10.Extracellular vesicles derived from nasopharyngeal carcinoma induce the emergence of mature regulatory dendritic cells using a galectin-9 dependent mechanism.
源自鼻咽癌的细胞外囊泡利用半乳糖凝集素 9 依赖性机制诱导成熟调节性树突状细胞的出现。
[J Extracell Vesicles] PMID: 38117000
摘要：鼻咽癌来源的小细胞外囊泡（NPCSEV）对肿瘤微环境具有免疫抑制作用。在这项研究中，我们研究了它们对耐受性树突状细胞生成的影响以及它们携带的半乳糖凝集素 9 (Gal9) 在此过程中的潜在参与。我们分析了 NPCSEV 的表型和免疫抑制特性，并探讨了暴露于 NPCSEV 的 DC（NPCSEV-DC）调节 T 细胞增殖的能力。为了评估它们在病理生理水平上的影响，我们进行了实时荧光化学吸引测定。最后，我们使用专有的抗 Gal9 中和抗体分析了 NPCSEV-DC 的表型和免疫抑制功能，以评估 Gal9 在这种效应中的作用。我们描述了 NPCSEV-DCs 能够抑制T 细胞增殖，尽管它们具有成熟的表型。这些成熟的调节性 DC (mregDC) 具有特定的氧化代谢并分泌高水平的 IL-4。化学吸引试验表明 NPCSEV 可以优先招募 NPCSEV-DC。最后，非常有趣的是，使用抗 Gal9 抗体降低 NPCSEV-DC 的免疫抑制功能清楚地表明囊泡 Gal9 在 mregDC 诱导中的重要作用。这些结果首次揭示了NPCSEV利用半乳糖凝集素9依赖性机制促进mregDC的出现，并为针对NPCSEV的抗肿瘤免疫治疗开辟了新的前景。
11.MIBlood-EV: Minimal information to enhance the quality and reproducibility of blood extracellular vesicle research.
MIBlood-EV：用最少的信息来提高血液细胞外囊泡研究的质量和可重复性。
[J Extracell Vesicles] PMID: 38063210
今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！
