Title 文章名字：
Genetically Engineered Microvesicles Carrying Suicide mRNA/Protein Inhibit Schwannoma Tumor Growth
Author 作者：
Arda Mizrak 等
Highlight文章亮点：
特异性地使外泌体包裹目的蛋白/mRNA，使得药物可靶向作用癌细胞。
Backgroud背景需知：
Structure文章思路：
简单来说，这篇文章就是将CD和UPRT特异性包入Exosome中，将改造过的Exosome处理坐骨神经癌细胞后尾静脉注射裸鼠，并在小鼠腹腔注射prodrug：5-FC，5-FC就会导致被特异性表达CD和UPRT的癌细胞凋亡，从而抑制癌症产生。
Results实验结果
1. Exosome内部包裹了CD和UPRT的蛋白/mRNA
要实现文章的构想，首先要保证可以使Exosome特异性地包裹CD和UPRT。 为此，作者构建pCMV-CD-UPRT-eGFP质粒并转染入HEK-293细胞中，收集上清的Exosome，通过WB和qPCR的方式证明Exosome内部包裹了CD和UPRT的蛋白/mRNA，而不是实验设计问题导致Exosome外部的粘连。
2. 包裹了CD和UPRT的Exosome处理后，可以促进HEI-193（immortalized human NF2 schwannoma cell）和其他癌细胞U87、SF443死亡
3. 裸鼠实验证明，5-FC配合包裹了CD和UPRT的Exosome可以特异性杀灭癌细胞。
疑问：
DC（Different centrigugation）纯化出来的100nm-150nm Exosome，相对于蔗糖梯度离心来的50-60nm Exosome，相对于传统的Exosome定义的30-100nm，偏大，而本文中DC方法得出的Exosome效果更佳。
Takehome Tip：
- 特异性使Exosome包裹目的蛋白，实现靶向治疗的新途径；
- 去除Exosome粘连的DNA的影响，做出更准的实验的protocol。
Protocol： HEK-293细胞转染目的基因，收集上清，300g、16,000g梯度离心去细胞碎片，0.22um滤膜过滤，110,000g离心得到Exosome，最后用DNAse I处理即可。
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