本周hzangs在最新文献中选取了9篇分享给大家。这周的文章还是值得一读的，其中第1篇介绍了血小板释放的细胞外囊泡对肿瘤的抑制作用，刷新了我们认识；第2、3、4、5篇是本周JEV杂志最新发表的四篇文章，其中有涉及到细胞外囊泡NTA分析的误差来源分析，这对未来标准化分析细胞外囊泡提供了参考，还有提供一种建立在组织消化-差速离心-梯度密度离心等一系列操作上的组织中细胞外囊泡分离方法，相信这种方法将为我们提供分析组织中细胞外囊泡的新手段。关于JEV今年的新变化也是我们值得注意的，JEV今年文章的发表篇数明显 提速，相信该杂志按这样的速度发展，很快将会被SCI收录并具有自己的影响因子。 相关文章的原文都在论坛同名贴下，需要的可以到论坛下载。
1. Platelet microparticles infiltratingsolid tumors transfer miRNAs that suppress tumor growth.血小板释放的微粒浸润到实体瘤中并转运miRNAs来抑制肿瘤生长。 [Blood] IF= 11.84 PMID：28500171
摘要：血小板来源的的微粒（PMP）与肿瘤转移的增强和癌症恶化相关。循环系统中的PMP能够将血小板miRNA转移到血管细胞。而实体肿瘤脉管系统是高度可渗透的，这为PMP-肿瘤细胞相互作用提供了可能。在本文中，我们揭示了PMPs渗透人体和小鼠的实体瘤，并将血小板来源的RNA（包括miRNA）在体内和体外转移到肿瘤细胞中，导致肿瘤细胞凋亡。MiR-24是这一过程中的主要作用分子。PMP能够抑制肺癌和结肠癌异位肿瘤的生长，而通过在肿瘤细胞中阻断miR-24能够加速肿瘤在体内的生长，并消除了PMPs对肿瘤生长的抑制作用。相反，通过Par4缺失造成血小板微粒浓度降低的小鼠模型中肿瘤生长速度得到提升，通过回输PMP则可消除这一现象。进一步研究表明，PMP靶向与体内肿瘤细胞凋亡相关。我们确定了血小板微粒携带的miR-24在肿瘤细胞中的直接靶基因，其包括线粒体mt-Nd2和Snora75，一种非编码核仁小RNA。这些RNA在PMP处理的肿瘤细胞中表现miR-24依赖的抑制效果，能导致线粒体功能障碍和生长抑制。因此，血小板来源的miRNA通过微粒在体内浸润到实体瘤中的肿瘤细胞，调节肿瘤细胞基因表达，并影响肿瘤进展。这些发现提供了对水平RNA转移的机制的新见解，并增加了miRNA和PMP在肿瘤进展中的调节作用的新认识。血浆微粒介导的调控RNA的转移和基因表达的调节可能是增强血管通透性等重要过程的常见特征。
PS：血小板释放的微粒是我们在研究血浆外泌体时候常见的影响因素，这篇文章则以血小板释放的微粒为研究对象，揭示了其对肿瘤细胞的抑制作用，这一抑制作用是通过miR-24对肿瘤细胞中线粒体功能的影响进而促进肿瘤细胞凋亡实现的。这也提示我们在未来的研究过程中需要考虑血浆微粒携带的miRNAs对实验结果的影响，单纯的分析血浆总外泌体RNA可能会对我们的研究结果带来偏差。
2. Circulating exosome microRNA associatedwith heart failure secondary to myxomatous mitral valve disease in a naturallyoccurring canine model. 粘液瘤性二尖瓣疾病继发心力衰竭自发犬模型循环系统中外泌体miRNA成分及相关性分析。 [J Extracell Vesicles] IF? PMID：28804599
摘要：粘液瘤性二尖瓣疾病（MMVD）在人体中的功能和组织学上与二尖瓣脱垂（MVP）相同。目前，没有医疗方法可以延缓这种瓣膜疾病或相关心脏重塑的进展。因此，需要更好地了解与MMVD和MVP相关的分子病理学，从而寻找潜在的治疗靶点。循环外泌体包含有反映细胞生理学和病理学的小RNA，包括miRNA。本研究探讨了循环系统中外泌体miRNA（ex-miRNA）成分与MMVD，MMVD相关的心力衰竭（MMVD-CHF）和衰老之间的联系。从老正常/健康犬（n = 6），年轻正常犬（n = 7），MMVD（n = 7）的犬和MMVD-CHF（n = 7）的犬分离出Ex-miRNA。分别从正常犬（n = 8），MMVD（n = 8）的犬和MMVD-CHF（n = 11）的犬分离总血浆miRNA。使用逆转录定量聚合酶链反应评价特定miRNA的表达丰度，与其他三组相比，使用MMVD-CHF的犬，外泌体miR-181c（p = 0.003）和miR-495（p = 0.0001）显着增加。与年龄匹配（老）正常犬相比，具有MMVD和MMVD-CHF的犬的外泌体miR-9（p = 0.002）增加。与老年犬相比，具有MMVD的犬的外泌体miR-599（p = 0.002）降低。在总血浆中，在正常犬，具有MMVD犬和具有MMVD-CHF的犬之间，58个miRNA被认为显着不同（p <0.04）。然而，与前述外泌体miRNA相比，在错误发现率<15％时，总血浆中的miRNA都不具有统计学意义。在年龄（miR-9，miR-495和miR-599），MMVD（miR-9和miR-599）和从MMVD到CHF（miR-181c和miR- 495）等方面 外泌体miRNA表达水平的变化似乎比总血浆miRNA更具特异性。
PS：对这个领域的专业名词不是很理解，翻译不当之处请大家多多包涵。这是一篇相关性分析的文章，发表在JEV上也有它的道理，分析的比较全面也比较客观，大家可以学习一下。
3. A rigorous method to enrich forexosomes from brain tissue.一种用于分离和富集脑组织外泌体的严谨方法。 [J Extracell Vesicles] IF? PMID：28804598
摘要：几乎所有的细胞都会释放包括外泌体在内的细胞外囊泡，其中也包括神经系统的细胞。外泌体能够在近端和远端的细胞间递送脂质，蛋白质和核酸，它许多神经系统疾病的进展中发挥作用。迄今为止，关于这些囊泡在健康和疾病状态中的作用的大多数分析依赖于从体外样品（例如条件细胞培养基或体液）分离和研究囊泡的功能和影响。在本文中，我们采取了一种严谨的方法来富集和定性分析从人额叶皮质分离的外泌体。该方法保持了囊泡及其内容物的完整性，并且综合的蛋白质组学和基因组表征证实所得细胞外囊泡作为细胞内体衍生的外泌体的合理性。这种方法将使神经科学家能够获得关于大脑中外泌体的更详细信息，并探讨囊泡在细胞间通讯的作用，以及探讨特定来源的脂质，蛋白质和RNA在健康/疾病脑中的功能。此外，该方法也可能用于从其他组织中分离外泌体。
PS：细胞外囊泡相关研究在近些年愈发火热，但是目前大量的研究集中在分离出体外培养或血浆中的细胞外囊泡用于研究，真正做到组织层面细胞外囊泡研究的文章少之又少，这主要是受制于目前研究方法，目前还没有比较好的方法来分离组织中的细胞外囊泡。本文则重点介绍了一种从组织中分离细胞外囊泡（主要是外泌体）的方法，该方法是通过组织消化结合差速离心和梯度密度离心实现的，拿到的囊泡经过验证确实主要来自于细胞内体，正在关注组织外泌体提取方法的朋友可以学习一下。
4. Size and concentration analyses ofextracellular vesicles by nanoparticle tracking analysis: a variation study. 使用纳米粒子跟踪分析系统（NTA）检测细胞外囊泡样品中的粒子大小和浓度：关于检测误差的研究。 [J Extracell Vesicles] IF? PMID：28804597
摘要：目前用于表征细胞外囊泡（EVs）的方法需要进一步的标准化，以使不同研究获得的数据具有可比性。 细胞外囊泡的大小和浓度可以通过纳米粒子跟踪分析（NTA）来确定。然而，细胞外囊泡的异质性和仪器设置的选择都可能导致明显的分析结果变化。 我们使用两台位于不同实验室的 NanoSight NS500仪器对细胞外囊泡和人造囊泡或微珠等不同制剂进行了组内测定（日内，n = 6）和组间测定（日间，n = 6）变化（变异系数，CV）。所有分析由相同的操作者进行。我们还评估了对每个样品类型和仪器应用相同软件设置或仪器优化设置对测定结果的影响。最后，研究了不同操作者和两个不同版本软件对测定结果的影响。在同一仪器上测量的细胞外囊泡和人造样品的组内测定CV为1-12％。两种仪器的整体日常变化类似，从2％到25％不等。然而，使用相同的软件设置，两个仪器测试却得到了显着不同的结果。使用仪器优化设置则可以减少仪器之间的差异，最终使这些差异很少甚至没有显着的差异。在同一仪器上使用仪器优化设置分析单核细胞来源的囊泡或二氧化硅微球，不同的操作者和软件版本的影响与一位操作者的整体日常测试结果变化相比并没有显着差别。根据应用的仪器设置和技术条件，两个类似的NTA仪器之间的性能差异可能会在分析EV时显示大小和浓度测量的显着差异。上述结果表明，我们应当关注目前仪器的开发精度和标准化，关注分析以及监测生物和合成样品时使用的参数设定。
PS：细胞外囊泡的直径大小和浓度分析是我们研究细胞外囊泡功能的前提，目前NTA分析技术是最为常见的分析方法之一。对比和分析不同的研究，其前提是不同研究所定量和定性的细胞外囊泡具有可比性，但目前细胞外囊泡研究的标准化分析方法还有待建立。本文关注了NTA分析过程中可能带来统计误差的因素，让我们对目前的细胞外囊泡定性方法存在的一些可能问题有了一个新的认识。
5. Characterisation of tumour-derivedmicrovesicles in cancer patients' blood and correlation with clinical outcome.定性分析癌症患者血液来源肿瘤细胞微囊泡与临床预后的相关性。 [J Extracell Vesicles] IF? PMID：28804596
摘要：为了评估源自质膜的肿瘤衍生的微囊泡（T-MV）是否可以作为合适的癌症生物标志物，我们从具有局部晚期和转移性实体瘤的癌症患者的外周血样品（n = 330，包括79头颈癌，74例肺癌，41例乳腺癌，28例结肠直肠癌，108例其他癌症）和对照组样品（n = 103）种分离纯化了微囊泡。使用流式细胞术鉴定了微囊泡样品。我们发现携带肿瘤相关蛋白MUC1，EGFR和EpCAM的微囊泡在特定肿瘤亚型的患者血液中特异性增强，基质金属蛋白酶诱导剂EMMPRIN的表达在所有肿瘤类型均增加。较高水平的EMMPRIN + 微囊泡与总体生存率降低显著相关，而其他标志物仅在特定肿瘤亚型中与预后相关。通过结合所有四种肿瘤相关抗原，能够将癌症患者与健康对照进行区分，AUC高达0.85。与对照组相比，EMMPRIN的高度糖基化能够使来自癌症患者的离体全MV样品能够诱导巨噬细胞向支持肿瘤表型分化，并增加肿瘤细胞侵袭。总之，使用标准技术检测全血中的肿瘤来源微囊泡，即使数量很少，其依旧可以用于临床结果相关分析。。
PS：使用流式细胞术分析患者血液中微囊泡携带的抗原用于分析临床预后的探索性文章，文章发现了一些与肿瘤预后相关的标志物，感兴趣的同学可以读一读。
6. Exosomal formulation of anthocyanidinsagainst multiple cancer types.外泌体包裹的花青素对多种类型肿瘤具有抑制作用。 [Cancer Lett] IF=5.99 PMID：28202351
摘要：在过去二十年中，浆果和浆果生物活性成分，特别是花青素及苷元花青素（Anthos）已经表现出优异的抗氧化，抗增殖，凋亡和抗炎特性。然而，它们的物理化学和药代动力学特性如低渗透性和口服生物利用度差等被认为是花青素药物开发中的不利因素。因此，需要开发有效的药物递送系统并提高其生物利用度。在本研究中，我们使用从生牛奶中收获的外泌体制备了含有越桔衍生的Anthos的纳米制剂。与游离的Anthos相比，Anthos的外泌体制剂在体外能够对各种癌细胞发挥抗增殖和抗炎作用。我们的数据还显示，与裸鼠中肺癌肿瘤异种移植模型中，相比游离Anthos，Anthos外泌体制剂的治疗反应显着增强。 同时Anthos在野生型小鼠中没有显示出总体或全身毒性的迹象。因此，外泌体相关制剂为口服递送Anthos提供了有效的解决方案，其有效性，成本效益和安全性都具有一定优势，该方案可以被开发为无毒的，广泛适用的治疗剂。
PS：使用外泌体递送特定药物用于治疗的文章报道。该文章解决了花青素相关制剂低渗透性和利用度差等问题，提高了花青素相关药物的效果。
7. Biogenesis and function ofESCRT-dependent extracellular vesicles.ESCRT依赖的细胞外囊泡生物发生和功能。 [Semin Cell Dev Biol] IF=5.18 PMID：28807885
摘要：从细菌到人，这些生物的细胞都会分泌大量具膜结构的细胞外囊泡。然而，最近的研究才使我们开始清晰起来，蛋白质和RNA的外泡运输对于正常生理学和许多病理状况是如此重要。细胞外囊泡包括由细胞内体衍生的多泡体中的外泌体释放形成的及通过从细胞表面直接出芽形成的两大类。细胞外内容物运输分选所需的内体分选复合物组分（ESCRT）涉及外泌体的发生。因此，ESCRT机制的研究可以为细胞外囊泡的形成和功能提供重要的见解。在本综述中，我们首先描述ESCRT组分对不同类型细胞外囊泡生物发生作用的细胞生物学机制。然后，我们讨论了ESCRT在细胞外囊泡内容物分选过程中重要作用，包括传播发育信号分子和胚胎形态发生，调节社会行为和宿主 - 病原体相互作用，最后讨论了ESCRT在神经退行性病变和癌症的发生发展中的作用。
PS：内体分选复合物ESCRT 是细胞外囊泡内容物分选中发挥重要作用的组分，这篇综述介绍了其在细胞外囊泡发生过程中的作用。
8. Antibiotic-induced release of smallextracellular vesicles (exosomes) with surface-associated DNA. 抗生素诱导小细胞外囊泡（外泌体）表面结合DNA现象的发生。 [Sci Rep] IF=4.259 PMID：28811610
摘要：最近，细胞外囊泡（其中包括外泌体体，微囊泡和凋亡小体等）的生物学作用在生物医学的各个领域都引起了广泛的关注。在本文中，我们研究了细胞持续暴露于氟喹诺酮类抗生素环丙沙星对释放的细胞外囊泡的影响。环丙沙星广泛应用于人类抗细菌感染以及针对支原体污染的细胞培养物中。然而，环丙沙星是哺乳动物细胞的氧化应激和线粒体功能障碍的诱导剂。结果令人意外，在这里我们发现环丙沙星诱导了DNA（线粒体和染色体序列）和DNA结合蛋白结合于小细胞外囊泡（即本文称之为外泌体）膜上释放。此外，无标记的光学生物传感器分析发现DNA依赖的外泌体与纤连蛋白结合。进一步实验并没有显示出外泌体表面结合DNA对细胞激活或细胞凋亡存在影响。我们的研究结果首次揭示了长时间低剂量环丙沙星暴露导致与外泌体外表面相关的DNA的释放。
PS：本文介绍了抗生素低剂量长期刺激对细胞外囊泡表面出现结合DNA的现象。文章并没有进一步解释机制，但是这个发现很值得我们了解和关注。
9. Platelet-derived ExtracellularVesicles: An Emerging Therapeutic Approach. 血小板来源的细胞外囊泡：一种新兴的治疗手段。 [Int J Biol Sci] IF=3.98 PMID：28808416
摘要：细胞外囊泡（EVs）是近些年新发现细胞间通讯方式，同时它还可以在细胞间转运一些被认为受膜屏障（包括膜蛋白，胞质蛋白和RNA）限制的生物大分子。 血小板来源的细胞外囊泡是血液中最丰富的细胞外囊泡，它的发现经过了非常曲折的过程。 起初，血小板来源的细胞外囊泡被认定为“血小板粉尘”，由于细胞外囊泡的研究技术有限，因此血小板来源细胞外囊泡的研究并没有顺利进行。 细胞外囊泡研究技术的进步促进了该领域跨越式的发展，近些年的研究揭示了的血小板来源细胞外囊泡越来越多具有吸引力的特性，学者围绕这些特性开始了进一步的研究。 本综述的目的是介绍关于血小板来源细胞外囊泡在组织修复和肿瘤进展中相关作用的最新知识。 强调血小板来源细胞外囊泡的潜在作用机制。同时讨论了目前和未来研究方向的局限性。
PS：一篇介绍血小板细胞外囊泡的综述文章，总结了目前该领域的研究进展。
原文下载：http://www.exosome.com.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=1723&extra=
