目前，由细胞分泌的纳米囊泡、外泌体和其他膜结合颗粒正在获得大量研究关注，因为它们已被证明在许多生物过程中发挥重要作用。现在认为囊泡介导着细胞通讯，包括病理介导的骨骼钙化。长期以来认为，基质囊泡（Matrix vesicles）是骨骼调控性矿化的核心。然而，这项研究非常难以进行，因为从骨骼中提取囊泡很难。与纯脂质囊泡相比，基质囊泡的一个难题是矿物质含量的存在，这意味着无法利用诸如超速离心等标准分离过程根据大小或重量精确分离。
近日，来自伯明翰大学的工程师报告使用免疫沉淀过程将基质囊泡从器官型骨骼培养系统中分离出来。他们使用聚合物磁珠来提取基质囊泡，所述聚合物磁珠用针对组织非特异性碱性磷酸酶（TNALP）的抗体修饰，组织非特异性碱性磷酸酶（TNALP）是骨衍生囊泡中丰富的表面标记物。所分离的囊泡对三磷酸腺苷（ATP）是阳性的，三磷酸腺苷是TNALP的底物，并且证实与I型胶原（骨中发现的主要胶原蛋白类型）具有高度结合亲和力。该研究方法为研究人员提供了更详细地研究骨骼矿化过程和调节。
图：（a）含有成骨细胞的骨组织样构建体的开发与培养，在此过程中发生骨化过程，出现显著的矿物沉积、基质密度增加。 （b）在培养皿中收集培养基并进行纳米颗粒分析。 （c）来自对照组（含血清无细胞的培养基）、14天和1年的培养基样品的动态光散射分析。与对照相比，来自短时间的和成熟的构建体的培养基包含尺寸范围为50-300nm的纳米颗粒。 （d）在室温下，在PBS-Tween 20中将1000μl培养基与Ab-MB复合物温育15分钟，进行来自该群体的基质囊泡的免疫分离。单克隆抗体附着于其上包含TNAP的囊泡（e）的外膜。 （f）将Ab-MB-MV复合物与未结合的抗体和颗粒分离。 Ab =抗体，MB =磁珠。
参考文献：Iordachescu A, Hulley P, Grover LM. (2018) A novel method for the collection of nanoscopic vesicles from an organotypic culture model. RSC Adv 8(14):7622-7632.
外泌体资讯网 一种从骨骼器官培养模型中收集纳米囊泡的新方法
