外泌体是多种细胞类型都能释放的30-100纳米大小不等的微小膜泡。在生物体液中也发现外泌体的存在,并且含有多种蛋白质,脂质和核酸分子。起初人们以为只是一些细胞碎片,但现在外泌体在生物功能调节和疾病中的作用越来越受到大家的重视。
从细胞培养上清和生物体液中分离外泌体已有多种方法。由于它们的尺寸小和密度低,差速超速离心和超滤法是最常用的外泌体分离技术。然而,HIV-1感染个体的血浆中既有外泌体又有HIV病毒颗粒,其尺寸和密度相似。因此,从含HIV病毒颗粒的人血浆中有效分离外泌体一直是个难题。
为了解决此限制,来自莫尔豪斯医学院的研究人员在Cantin等人的工作基础上从含HIV病毒颗粒的人血浆中有效分离外泌体的方法——碘克沙醇密度梯度离心法。病毒颗粒用P24 ELISA鉴定。外泌体用乙酰胆碱酯酶(AChE)、CD9、CD63和CD45鉴定。该方法分离的外泌体中无病毒颗粒的污染。这种从含HIV病毒颗粒的人血浆高效分离外泌体的方法使得我们能够检测含HIV病毒颗粒的血浆中外泌体的含量,并研究它们的免疫调节潜力和其他生物学功能。
那么他们是怎么把外泌体从病毒颗粒中分离开的呢?干货呈上来!来看操作视频吧。
文献下载:
Konadu-2016-Isolation of Exosome
补充材料下载:
jove-materials-53495-isolation-of-exosomes-fro
视频下载:
jove-Isolation of Exosomes from the Plasma of HIV-1 Positive Individuals.part1
jove-Isolation of Exosomes from the Plasma of HIV-1 Positive Individuals.part2
jove-Isolation of Exosomes from the Plasma of HIV-1 Positive Individuals.part3
外泌体资讯网 怎么从含HIV病毒的血浆中分离外泌体呢?来看操作视频吧