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细胞培养上清、新鲜血浆、冻存血浆里外泌体提取的不同方案

在过去的几十年里,对于肿瘤微环境的研究不仅局限于肿瘤发展和转移,而且包括了肿瘤对药物的耐药性方面。外泌体是起源于体内细胞的微小膜结构囊泡,包含了很多mRNA、DNA以及蛋白质。它会被很多类型细胞分泌,包括肿瘤细胞。越来越多的证据证明肿瘤细胞来源的外泌体对肿瘤微环境有很重要的调节作用。通过了解外泌体和肿瘤微环境是如何影响肿瘤药物耐药性,我们就可以开发新的或者改进目前治疗癌症的治疗方法。

研究的首要任务便是外泌体的提取。在这项研究中,来自葡萄牙诺瓦大学的研究者建立了一套研究方法,针对细胞培养上清、新鲜血浆和冻存血浆制定了不同的外泌体提取方案,并接着用电子显微镜、NanoSight和Western blot进行了验证。

具体内容可参见文献:André Mdo R, Pedro A, Lyden D. (2016) Cancer Exosomes as Mediators of Drug Resistance. Methods Mol Biol 1395:229-39.

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图:Exosome purification procedures for cultured cells, fresh plasma, and frozen plasma

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