眼泪在保持眼睛舒适、预防微生物感染、促进伤口愈合和保持高质量的视觉等方面起着至关重要的作用。眼泪中含有细胞外囊泡,但是目前人们对眼泪细胞外囊泡的基本参数和功能缺乏了解。
近日,来自厦门大学化学化工学院颜晓梅教授课题组的研究人员在实验室中自行搭建了纳米流式检测仪对眼泪细胞外囊泡进行了单颗粒水平的多参数定量分析,相关成果以“Single-particle analysis of tear fluidreveals abundant presence of tissue factor-exposing extracellular vesicles withstrong coagulation activity”为题发表于国际著名杂志Talanta上(Talanta, 2022, 239, 123089)。厦门大学博士研究生刘海生为该论文的第一作者,研究工作得到了国家自然科学基金的支持。
该论文使用眼泪采集试纸条(Schirmer tear test strip)采集眼泪,将采集了眼泪的试纸条浸泡于PBS中,使用超速离心法提取眼泪细胞外囊泡。随后,使用纳米流式检测仪结合免疫荧光标记等方法对眼泪细胞外囊泡的纯度、浓度、粒径分布、蛋白标志物表达和组织因子丰度等参数进行定量表征。
研究发现采用超速离心纯化的眼泪细胞外囊泡:1) 纯度大约为80%;2) 粒径主要分布在40 - 150 nm;3) 颗粒浓度为1.1± 0.7 × 1011 个/毫升(6位健康受试者);4) CD9、CD63和CD81蛋白表达丰度较低,而CD47和CD45的丰度较高;5) 含有高丰度的组织因子阳性细胞外囊泡,颗粒浓度为4.4 ± 3.1 × 1010个/毫升。此外,凝血实验表明眼泪具有很强的凝血活性,其凝血活性主要来源于眼泪中细胞外囊泡携带的组织因子,因为去除了细胞外囊泡的眼泪不具有凝血活性,使用组织因子抗体封闭组织因子后眼泪的凝血活性显著降低。综上,这篇文章首次报道眼泪中含有高丰度的组织因子阳性细胞外囊泡,从而赋予眼泪很强的凝血活性。
参考文献:
Single-particleanalysis of tear fluid reveals abundant presence of tissue factor-exposingextracellular vesicles with strong coagulation activity. Talanta, 2022, 239, 123089